タカラバイオ / タカラバイオ ID: J01837

Virome(ウイルス叢)の網羅的解析 ID: J01837

サービスについて

特長

  • DNA / RNAウイルスが混在した核酸からのライブラリー調製
  • ヒト全ゲノムシーケンス(WGS)およびRNA-Seqデータから独自のノウハウで宿主ゲノムの除去・フィルタリングを行うことで、高精度なウイルス種の検出が可能に
  • 宿主ゲノムに挿入されたウイルスの挿入位置を検出
  • 取得済みヒトWGSまたはRNA-Seqデータを用いたウイルス検出も可能

サービス内容

ウイルスが混在した核酸から、目的ウイルス種(ssDNA/dsDNA/ssRNA/dsRNAウイルス)に合わせたライブラリー作製を行い、全ゲノムシーケンス・RNA-Seqを行います。
ヒト全ゲノムシーケンス・RNA-Seqデータから宿主ゲノム(ヒトゲノム)を除去した非宿主シーケンスデータを抽出し、メタゲノムデータベースを用いて生物種分類を行い、ウイルス種カウントリストを作成します。検出されたウイルス種のゲノム参照配列にシーケンスデータを再マッピングし、偽陽性でないことを確認することで解析結果の精度を高めます。同時にウイルスゲノムが宿主ゲノムに挿入されている場合(プロウイルス)、その挿入位置を検出します。
*事前に解析対象外ウイルス情報をいただければ、解析結果からの除外も可能です。
*ヒト以外の生物種由来サンプル、環境サンプル等の解析はご相談ください。

(情報解析の流れ)
独自のノウハウにて高精度なウイルス検出を実施します。(fig.1)

受入サンプル

  • Total RNA/DNAなど

    以下の点にご注意の上、解析サンプルを調製してください。
      サンプル量 濃度 液量(目安) 純度
    OD260/OD280 OD260/OD230
    DNA / RNA 50ng以上 3ng/μL以上 17μL以上 1.6以上
    DNA 50ng以上 3ng/μL以上 17μL以上
    RNA 50ng以上 3ng/μL以上 17μL以上
    その他 核酸抽出からご希望の場合はご相談ください。
    ウイルス濃縮作業はお受けしておりません。

    * 解析目的、目的ウイルス種によってライブラリー作製手法を選択します。ライブラリー作製方法によって必要な核酸量が変わる場合がございます。
    * 上記の核酸量は目安です。上記より少ない量からの解析も可能です。ウイルスが検出されるかは、検体中に含まれるウイルス由来核酸量・割合によります。
    * 宿主(ヒト)由来の核酸が混在した状態を想定しています。ウイルス核酸を濃縮されている場合は事前にご相談ください。
    ・DNA / RNAが混在しているサンプル、RNAサンプルはRNase free水に溶解してください。
    ・DNAは滅菌水もしくはReduced EDTA TE buffer:10 mM Tris-HCl、0.1 mM EDTA pH8.0に溶解してください。

    【サンプル送付容器について】
    ・核酸サンプルは、1.5mLチューブでご提供ください。0.2mL、0.5mL、8連チューブでのご提供はご遠慮ください。
    * 24検体以上の場合は96 well plateでご提供ください。プレートで送付いただけない場合は、納期が延びる場合がございます。

    <推奨プレートおよびシール>
    ・Eppendorf twin.tec full-skirted 96-well PCR plates(Eppendorf社、 No. EP-0030128.648)
    ・タイタースティックHCフィルム(WATSON社, No. 547-KTS-HC)

  • シーケンスデータ
    ヒト全ゲノムシーケンス解析・RNA-Seq解析で得られたシーケンスデータ(fastqファイル)またはマッピングデータ(bamファイル)
    * ライブラリー作製手法に依存して検出されない、されにくいウイルス種もございます。

納品物

  • 作業報告書
  • シーケンスデータ(fastq形式)* シーケンスからご依頼の場合
  • ウイルスカウント結果、マッピング結果等
    (*ウイルスやウイルス挿入が検出されなかった場合、下記ファイルは納品物に含まれません。)
    ・ウイルスカウント結果(xlsx形式)
    ・マッピング結果(bam形式)
    ・ウイルス挿入位置リスト(xlsx形式)
(納品物例)
・ウイルスカウント結果(fig.2

ご注文に関して

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参考価格・納期

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