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ロングアンプリコン解析(PacBio Sequel) ID: J01741

サービスについて

サービス内容

プラン 説明 取得リード数 価格(税抜) 納期
16S rRNA V1-V9
(原核生物が対象)
*Strain IDプランとComplete V1-V9プランは終了しました(ライブラリー調製キットが販売終了のため)。
16S rRNAのV1-V9領域(約1,500 bp)を解析します 3万リード程度 1~7サンプルの場合¥40,000/サンプル
8~23サンプルの場合¥35,000/サンプル
24サンプル以上の場合¥30,000/サンプル
30営業日
カスタムロングアンプリコン 多様な配列の解析を目的とし、任意の領域(1 kb~数 kbまで)を解析したい場合に適しています。 3万リード程度 1~7サンプルの場合¥70,000/サンプル
8~23サンプルの場合¥60,000/サンプル
24サンプル以上の場合¥50,000/サンプル
プライマー合成完了後、PCR条件検討
20営業日

解析
30営業日
+初期費用
●プライマー合成(*1)
¥20,000/プライマー
●PCR条件検討(*2)
¥100,000/プライマー

*1 5’末端にAmino Modifier C6修飾プライマーを合成する必要があるため、プライマー合成費用が初期費用としてかかります。プライマー配列をご指定ください。プライマー設計からのご相談も承っています。
*2 ご指定のプライマー(NGS用のタグは付加されていないプライマーでOK)で対象領域が増幅できることを確認済であり、PCR反応条件の情報をご提供いただける場合、PCR条件検討費用は不要です。
条件検討についての注意事項は、生物技研HP「3.よくある質問」のQ2とQ3をご覧ください。

作業内容

  • 送付DNAの品質確認
    蛍光法による2本鎖DNAの定量および電気泳動による断片長の確認を行います。
  • シーケンスライブラリー作製
    PCR法でライブラリーを作製します。
  • シーケンシング解析
    PacBio Revio または Sequel IIeを用いてHiFiリードを取得します。
  • データ解析(系統解析を行います)
    <系統解析に用いるデータベース>
    細菌16S rRNAの解析の場合:MIrROR
    その他(virus等含む)の場合:NCBI
  • データ解析は以下に変更可能です
    ・データ解析不要(-¥500/サンプル)
    ・カスタム多型解析(¥0):各アレルのリード数をエクセル形式で納品します。
    ・変異点解析(¥10,000/各参照配列):参照配列に対する変異箇所を同定し、得られた変異点をサンプル間で比較します。

ご提供サンプル

抽出DNA
濃度1ng/μL以上で液量20μL以上、かつ対象領域の長さ以上のDNA断片が確認できていること。
  • カスタムロングアンプリコンをご依頼の方
     PCR条件をご提供いただく場合・・・そのPCR条件で2-3回調製可能なDNA量を送付ください。
     PCR条件検討をご依頼いただく場合・・・多めに(可能であれば濃度5 ng/ul以上で液量40 ul以上)ご送付ください。

  • 納品物

    以下のデータをダウンロード形式で納品します。
    但し、データ量が4GBを超える場合は、記録媒体での納品に変更させていただきます。

    • 報告書
    • シーケンス生データ(fastq形式)
    • 系統解析結果
    • DDBJのデータベース登録に必要なデータ

    ご注文に関して

    お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

    参考価格・納期

    サービス項目 価格(税抜) 納期
    ロングアンプリコン解析(PacBio Sequel) 上記、サービス内容をご確認ください 上記、サービス内容をご確認ください
    オプション(DNA抽出&データ解析)
    項目 備考 価格(税抜) 追加納期
    DNA抽出 試料を送付いただき、生物技研社でDNA抽出を行います。 1~2サンプル:¥10,000/サンプル
    3~7サンプル:¥24,000/式
    8サンプル~:¥3,000/サンプル
    5営業日
    群間比較解析
    *細菌16Sのみ対応
    LEfSeを使って比較する群間の違いと相関を示す微生物群の抽出やある現象の原因微生物の探索を行います。 ¥30,000/解析
    *比較パターンが複数ある場合は、追加1パターンごと¥10,000
    なし
    多様性解析 Qiime2のdiversityプラグインを用いて、レアファクション解析(chao1やshannonなど)と主座標分析(PCoA)を行います。 ¥10,000/解析 なし
    多様性解析の統計解析 ベータ多様性はPERMANOVAで検定し、アルファ多様性はKruskal-Wallisで検定します。 ¥20,000/解析 なし
    機能予測解析
    *細菌16Sのみ対応
    PICRUSt2を用いて、菌叢解析結果を特定の機能(酵素・KEGG ID・代謝パスウェイ)へと紐づける予測を行います。サンプルのグループ分けをご指示いただくことで、グループ単位での比較が可能です。 ¥30,000/解析 なし
    機能予測解析の統計解析
    *細菌16Sのみ対応
    STAMPを用いて、比較するグループ間で機能予測解析結果に有意な差がみられるかを検定します。 ¥30,000/解析
    *比較パターンが複数ある場合は、追加1パターンごと¥10,000
    なし

    関連サイト