Cancer Precision Medicine:CPM / Cancer Precision Medicine ID: J01680

ELISPOT解析 ID: J01680

ELISPOT解析は、がんや自己免疫疾患、感染症、アレルギーなどの様々な疾患において、抗原特異的免疫応答を研究するために幅広く利用されています。

サービスについて

概要

ELISPOT解析により、ヒト末梢血単核球(PBMC)中に存在する細胞傷害性T細胞(CTL)から産生されるIFN-γ を単一細胞レベルで検出し、抗原特異的な免疫応答を確認します。ELISPOT解析は、がんや自己免疫疾患、感染症、アレルギーなどの様々な疾患において、抗原特異的免疫応答を研究するために幅広く利用されています。

特長

  • 日本国内完結型の受託解析サービス
  • CTLによる免疫応答(IFN-γ 産生)を検出
  • 前培養によりサンプル中に存在するペプチド特異的CTLを増殖させることで、存在頻度の低いCTLも検出可
  • 「申請資料の信頼性の基準(医薬品、医療機器等の品質、有効性及び安全性の確保等に関する法律施行規則第43条)」に準拠した試験にも対応

解析内容

ご提供いただいたヒトPBMCを前培養した後、ELISPOT解析を用いてCTLから産生されるIFN-γ を単一細胞レベルで検出します。前培養なしでの実施や、スポット計数のみのご依頼も承ります。
前培養(IVS) ELISPOT解析の前に、PBMCをペプチドおよびサイトカインで刺激を加えながら2週間培養します(in vitro sensitization;IVS)。ペプチド特異的CTLを活性化し増殖させることができ、存在頻度の低いCTLによる免疫応答を検出する場合に推奨しています。
ELISPOT解析 IFN-γ 特異的なキャプチャー抗体が固相化されたウェルにPBMCを播種し、ペプチド提示細胞と共培養します。ペプチド特異的CTLから産生されたIFN-γ とキャプチャー抗体が結合することで、細胞が位置していた場所にスポットが形成されます。形成されたスポットを、ImmunoSpot アナライザー(Cellular Technology Limited)で自動計数します。
【受託パターン】
ELISPOT解析 ご提供いただいたPBMCを前培養後、IFN-γ ELISPOT解析を実施し、検出したスポット数データおよびELISPOTプレートの撮影画像をご報告いたします。
ELISPOT解析(前培養なし) ご提供いただいたPBMCを用いて、前培養せずにIFN-γ ELISPOT解析を行います。検出したスポット数データおよびELISPOTプレートの撮影画像をご報告いたします。
スポット計数のみ お客様でELISPOT解析を実施した後の乾燥済みプレートをお預かりし、スポット計数のみ行います。検出したスポット数データおよびELISPOTプレートの撮影画像をご報告します。ELISPOT解析でのサイトカインの種類によらず対応可能です。

ご提供いただくサンプル

以下の条件を満たさない場合や、ウイルス等による感染性が疑われるサンプルの場合は事前にご相談ください。

解析内容 材料 必要量 保存容器 保存方法
ELISPOT解析 ヒトPBMC 6×106cells程度
(抗原ペプチド1種類あたり)
解析条件に依存するため要相談
1.5~2 mLチューブ 細胞保存液を添加し、-80℃
抗原ペプチド 粉末 2 mg
(凍結乾燥、純度95%以上)
0.5~2 mLチューブ 各ペプチドの最適保存条件にて保存
ELISPOT解析
(前培養なし)
ヒトPBMC 6×106 cells程度
(抗原ペプチド1種類あたり)
解析条件に依存するため要相談
1.5~2 mLチューブ 細胞保存液を添加し、-80℃
抗原ペプチド 粉末 1 mg
(凍結乾燥、純度95%以上)
0.5~2 mLチューブ 各ペプチドの最適保存条件にて保存
スポット計数のみ 発色済み
96ウェルプレート
室温

サンプルのご送付

解析に必要なサンプルを、CPMクリニカルラボまでご送付ください。月~金曜日(祝祭日を除く)着にて手配をお願いいたします。解析内容により、送付日の調整をさせていただく場合がございます。

  • サンプルには、解析依頼書別紙「サンプルリスト」もしくは「プレートリスト」を同梱してください。
  • 各サンプルチューブ(もしくはプレート)に、解析依頼書別紙「サンプルリスト」(もしくは「プレートリスト」)に記入したサンプル番号もしくはサンプル名を明記してください。
  • サンプルは、以下の輸送条件にて着払いでご送付ください。
  • 専門業者による輸送も承っております。ご希望の場合は事前にご相談ください。
サンプルの保存条件 輸送条件
室温 通常便
冷蔵(4°C)、冷凍(-20°C)、超冷凍(-80°C) ドライアイス梱包・冷凍便

納品物

以下のデータを納品いたします。

  • ELISPOTプレート画像(JPEG)
  • スポット計数結果(Excel)
納品方法:以下のいずれか
     ・メール添付(パスワード付きZIPファイル)
     ・CD-R等
     ・クラウド

ご注文に関して

以下のファイルをご利用の上、お問い合わせフォーム からご送付ください。

専用注文書類

参考価格・納期

サービス項目 価格(税抜) 納期
ELISPOT解析 お問い合わせ お問い合わせ

関連サイト